Shin-RamDA-seq Kit包含文庫制備試劑，可以支持從cDNA合成到測序的全過程。

  本試劑盒，適用于從單細胞微量RNA ?全長 RNA 、分解 RNA 及lncRNA等各種 RNA中合成 cDNA，可分析基因的方向性（ 包含細胞裂解、基因組去除、RT 組分、 cDNA二鏈合成、片段化酶末端修復及連接等組分）

【關鍵詞】

?Single cell (單細胞 ）、 微量 RNA

?SMARTer , SMART-seq seq← 以往技術

?10X Genomics← 從細胞分離 到NGS 文庫制備的自動化系統

【訴求點】

? 可分析 non -poly poly(A )RNA ，也可分析無 poly(A) 的ncRNA，還能分析已被解失去 poly(A)的RNA

?檢出基因數量多 ，可檢測到迄今為止 少見 的基因

?可以分析骨骼 、胚胎 、神經細胞等 、神經細胞等 、神經細胞等 無法通過 10X解析的大細胞樣品 解析的大細胞樣品

?使用 scRNAseq了解作用機制并確認藥物效果→可以在單細胞 水平上分析剪接變異

本試劑盒的特點

  1.可從單個細胞或微量RNA 中制備cDNA，可以使用1～100 個細胞或者10pg～1ng total RNA 作為起始模板。

  2.可對整個RNA 長度進行分析，可制備出能覆蓋10kb 以上目的RNA 的全長cDNA

  3.能夠檢測各種類型的RNA，與傳統技術相比，檢測到的基因數量更多，除Poly(A) RNA 外，還可用于分析其他各類RNA

◇同源異構體及選擇性剪接的識別

◇poly(A) RNA 及non-poly(A) RNA (組蛋白RNA 及lncRNA)的檢測

◇核RNA(pre-mRNA 及lncRNA)的檢測

  4.可支持文庫制備（需要單獨的接頭），本試劑盒可用于Illumina NGS 中的文庫制備。（需單獨購買純化磁珠，如 Agencourt® AMPure® XP 試劑（Beckman Coulter）和接頭試劑盒，如TruSeq® DNA Single Indexes（Illumina））

  5、增強了鏈特異性

產品組成

  本試劑盒包含以下試劑,請在-20℃條件下保存。

GenNext® Shin-RamDA-seq® Single Cell Stranded Kit (Code: RML-101, RML-101T)

試劑名稱      保存      規格(RML-101) 規格(RML-101T)

①Lysis Buffer   -20℃   240 μL 60 μL

②Lysis Enhancer   -20℃   240 μL 60 μL

③RNase Inhibitor   -20℃   22 μL 6 μL

④Nuclease free water   -20℃   960 μL 240 μL

⑤RT-RamDA® Buffer   -20℃   240 μL 60 μL

⑥gDNA Remover   -20℃   54 μL 14 μL

⑦rRNA Remover   -20℃   30 μL 8 μL

⑧RT-RamDA® Enzyme Mix   -20℃   54 μL 14 μL

⑨RT-RamDA® Primer Mix   -20℃   54 μL 14 μL

⑩2nd strand synthesis Buffer   -20℃   330 μL 83 μL

?2nd strand synthesis Enzyme   -20℃   55 μL 14 μL

?2nd strand synthesis Primer Mix   -20℃   275 μL 69 μL

?Fragmentase   -20℃   120 μL 30 μL

?End Repair and A-tailing Buffer   -20℃   96 μL 24 μL

?End Repair and A-tailing Enzyme   -20℃   24 μL 6 μL

?Ligation Solution   -20℃   480 μL 120 μL

?Library Amplification Master Mix   -20℃   300 μL 75 μL

?Library Amplification Primer Mix   -20℃   120 μL 30 μL

注意：本試劑盒中包含的所有試劑均為研究用試劑，切勿將其作為診斷或臨床用試劑使用。在使用本試劑盒時，請嚴格遵守實驗室一般注意事項，安全操作。

福建省，請聯系：陳 173-5921-6592，林 159-8085-5879

參考文獻

(1) Hayashi T., et al. Single-cell full-length total RNA sequencing uncovers dynamics of recursive splicing and enhancer RNAs. Nature Communications. 9：619 (2018)

(2) Ozaki H., et al. Millefy: visualizing cell-to-cell heterogeneity in read coverage of single-cell RNA sequencing datasets. BMC Genomics 21:177 (2020)