●PCR、RT-PCR
●PCR反應體系的設定
建議的引物終濃度范圍是0.2-0.6μM,TaqMan® 探針的添加量請在終濃度0.05-0.3μM
的范圍內調整。擴增效率不理想的情況下,提高添加量可能會改善。相反,過量添加
可能會引起非特異擴增,從而導致檢出率降低。
在高速循環及粗樣本的檢測中,擴增率不理想的情況下,增加酶量(最大2倍),可
以得到改善。
●PCR反應條件的設定
退火/延伸的溫度建議設定在在55~65℃的范圍。
根據qPCR儀的不同,也可進行高速循環。循環內的變性時間以及退火/延伸
時間最短可設為1秒,請根據實際情況確定合適的反應條件。
●RT-PCR反應[HSTTX-111]
Mn(OAc)2的添加量在最終濃度2.5 mM的基礎上,根據RNA樣品的濃度及目的片段的序列
進行增減,可以獲得更好的效果。
●卓越的DNA擴增效率
以本公司獨有的酶TTx DNA Polymerase為基礎進行了反應組分的優化。 TTx DNA Polymerase比廣泛使用的Taq DNA Polymerase或Tth DNA Polymerase具有更強的延 伸性能,可在短時間的循環條件下進行高效擴增。
●粗樣品擴增能力強
在擴增含有PCR抑制劑的粗樣品(生物樣品材料、土壤、食品等)時性能卓越。血液 等樣品無需提取核酸,直接向反應液中進行添加,即可充分擴增。
●可進行高效率的1酶體系?1-step RT-PCR [HSTTX-111]
TTx DNA Polymerase具有很高的逆轉錄活性,即使微量模板也可高效地進行RTPCR。擴增效率高,短時間的循環條件下也能夠高效地擴增。也可用于DNA的檢測。
●含有dUTP [HSTTX-101]
本試劑2x Buffer for rTth/ TTx (DNA) 中含有dUTP。通過添加Uracil-NGlycosylase(UNG)*,可防止因攜帶污染產生的假陽性。
*本品中不含有UNG。
產品內容:
50mM Mn(OAc)2
Hot Start TTx DNA Polymerase(4U/μl)
62.5μl×1支
1ml×1支
2×Buffer for rTth/TTx (DNA)
Hot Start TTx DNA Polymerase(4U/μl)
250μl×1支
1.25ml×2支
2mM dNTPs (dATP, dGTP, dCTP, dTTP)
1ml×1支 5×Buffer for rTth/TTx (DNA/RNA)
62.5μl×1支
活性的定義:
在75℃活性測定條件下,在30分鐘內攝入
10nmoles的全核苷酸使成為酸性不溶物
時所需酶的活性定義為1U。
保存條件:
-20℃