用途

●RealTimePCR產品資料

說明

THUNDERBIRD^®Next SYBR^®qPCR Mix是將以往THUNDERBIRD^®qPCR Mix產品的組分大幅改良后的產品。通過提升PCR效率，抑制非特異反應（引物二聚體等的產生），可以獲得更廣的可定量區域。

本產品為2倍濃度的預混試劑，除引物以外的成分已預先混合。此外，對RealTime反應及信號無影響，有藍色染料著色，吹打時易于分辨，防止分裝錯誤。

THUNDERBIRD^®Next SYBR^®qPCR Mix是含有根據SYBR^®Green I檢測系列為RealTime PCR通用型passive reference dye預混試劑。在實現反應液配制簡便化的同時，將樣本間熒光強度誤差抑制到最小，可得到高度再現性的結果。

特征

●提高擴增效率
改良組分以提升PCR効率
●提高低拷貝域的檢測感度
高效率，尤其特異的擴增，可以進行廣泛的測序分析。
●高特異性
最優化的組分，提高PCR的特異性。降低非特異反應，可檢測出低濃度的目的片段，提升可信性。
●可用于延伸時間10秒的高速循環
●提升配制后反應液的穩定性
引物，模板混合后的PCR反應液具有高穩定性，即使樣本數多需要花費長時間配制也能得到穩定的結果。
●防止因攜帶污染造成的偽陽性
本產品組分中含有dUTP。
添加另售的Uracil-N-Glycosylase(UNG),Heat-labile[Code No.UNG-101]，可以防止攜帶污染造成的偽陽性。
●含有補正用色素，無需添加ROX
通常，用于一般需要補正的儀器中也無需添加ROX。此外，含有的補正用色素，不會影響SYBR^®Green I的檢測，因此可以用于各類儀器。

●著色原因，降低分裝失誤

有藍色染料著色，吹打時易于分辨，防止分裝錯誤。

產品內容

【QPX-201T】
THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix
1mL×1支
【QPX-201】
THUNDERBIRD® Next SYBR®  qPCR Mix
1.67mL×3支*

*含有passive reference dye 
本產品含有藍色染料。
分裝完成后的well為藍色，可降低分裝失誤。
該染料對qPCR反應及信號沒有影響。

基本反應條件

滅菌水 XμL
THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix 10μL
Forward Primer 6pmol
Reverse Primer 6pmol
UNG*[Code No:UNG-101] 0.4U
DNA樣本 YμL

Total Volume 20μL


(UNG*反應　20～25℃　10min.)

*本產品中不含UNG。使用另售的Uracil-DNA Glycosylase(UNG),Heat-labile[Code No. UNG-101]時的溫度條件及反應時間已在實驗例1中標示。


〈2step PCR〉: 高速
95℃, 30sec.
  ↓
95℃, 5sec.
60℃, 10sec.*
40 cycles
*有的儀器可能無法設置延伸時間為10秒

〈2step PCR〉: 普通
95℃, 30sec.
  ↓
95℃, 5sec.
60℃, 30sec.
40 cycles

〈3step PCR〉: Tm低于一般Tm(60℃)，或無法充分擴增時，可以試用此方法。

95℃, 20～60sec.
  ↓
95℃, 1～5sec
55～65℃, 5～30sec.
72℃, 10～60sec.
40 cycles