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          Quick Taq HS Dye Mix

          用途

          PCR

          說明

           本品為含有Taq DNA Polymerase的2×Master Mix(可進行熱啟動、并加入了電泳染料)。
          只要加入模板DNA及引物,即可進行PCR,反應產物可直接進行電泳分析。
          預先將Taq抗體加入到Master Mix中,通過熱啟動效果,可進行高特異性、高效率擴增。  

          特征

          ●2×Pre Mix(添加染料)
          本品為2×Master Mix,只需要加入模板和引物,即可方便地使用。由于預混了染料(BPB),PCR后可直接用于電泳上樣。

          ●優良的PCR性能
          通過使用優化的Buffer組分及高純度的Taq DNA polymerase,與原來的Taq DNA polymerase相比,PCR性能有了大幅度提高。

          ●采用熱啟動PCR
          采用使用抗Taq DNA polymerase抗體的熱啟動法,顯示了高靈敏和高特異性。

          ●保存穩定性高
          經驗證,反復凍融30次、4℃狀態下保存3個月對品質沒有影響。

          實驗例

          1.使用直接克隆PCR進行插入片段的檢測

          用含有500bp插入片段的質粒pTA2進行轉化大腸桿菌DH5α,以得到的克隆為樣品,在載體上設計引物進行PCR。
          結果顯示,可以得到跟插入片段長度相同的明亮的條帶。

          由此可見,使用本品進行直接克隆PCR,也可以得到良好的結果。


          2.人p53基因(2.9 kb)的擴增

          以人基因組DNA(50ng)為模板,以較難擴增的人p53基因(2.9kb)為目的片段進行擴增。結果可見,使用Quick Taq HS Dye Mix可得到最高效率和最高特異性。另外,可知在不采用熱啟動法的情況下(3、4泳道),特異性及靈敏度都很低(Quick Taq HS Dye Mix采用熱啟動法)。



          3.各種條件下擴增效率的比較

          以人基因組DNA (50ng)及大腸桿菌菌落為模板,擴增人的β-globin基因(1.3kb, 3.6kb)、及質粒插入片段(3.9kb)。
          反應分別按各試劑的最適條件進行。
          結果顯示,使用Quick Taq HS Dye Mix時,可進行高效率且高特異性地擴增。



          產品內容

          Quick Taq HS Dye Mix1.25ml×2管
          ※50μl反應體系,可使用100次。


          組分如下:
          rTaq DNA Polymerase
          抗Taq酶的抗體
          dNTPs
          電泳染料(BPB)
          Reaction Buffer

          基本反應條件

          滅菌蒸餾水Xμl
          2×Quick Taq HS Dye Mix25μl
          10pmol /μl Primer F1.0μl
          10pmol /μl Primer R1.0μl
          Genomic DNA(50ng/μl) ~200ng
          Plasmid DNA ~50ng
          菌落(※請參考實驗例)

          Total Volume50μl


          < 2步法循環>*

          94℃ 2min.

          94℃ 30sec.

          68℃ 1min./kb 25~40 cycles


          < 3步法循環>*

          94℃ 2min.

          94℃ 30sec.

          (Tm-5)℃ 30sec.

          68℃ 1min./kb 25~40 cycles

          *引物的Tm值低于73℃時,推薦使用3步法循環。


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