PCR
本酶是由Thermus aquaticus YT-1克隆出的耐熱性Taq DNA polymerase基因經大腸桿菌表達生成的重組型酶,與天然的Taq DNA polymerase具有相同的性質。因純度很高,所以具有卓越的特異性。
本品為含有Taq DNA Polymerase的2×Master Mix(可進行熱啟動、并加入了電泳染料)。
只要加入模板DNA及引物,即可進行PCR,反應產物可直接進行電泳分析。
預先將Taq抗體加入到Master Mix中,通過熱啟動效果,可進行高特異性、高效率擴增。
●有兩種類型可供選擇
備有另附Mg2+和含有Mg2+的兩種緩沖液,可結合實驗目的從中進行選擇。
基因組DNA的PCR反應示例
以Human基因組DNA(50ng)為模板,使用Primer 20pmoles、酶1.25U的條件進行50μl反應體系的擴增。Mg2+和dNTPs的終濃度分別為1.5mM和0.2mM,退火溫度為55℃。結果可見,從180bp到1.3kb的目的片段均可得到高效率的擴增。
產品內容
rTaq DNA Polymerase(5U/μl) 50μl
10×Buffer[TAP-2B(另附Mg2+)/TAP-2M(含有Mg2+)] 1ml
25mM MgCl2(僅適用另附Mg2+類型)[TAP-2S] 1ml
2mM dNTPs[NTP-201]* 1ml
*用本酶進行PCR時,請使用dNTPs[NTP-201]。其他的dNTPs,有時不能充分發揮PCR性能。
組分:
20mM Tris-HCl(pH8.0)
100mM KCl
0.1mM EDTA
1mM DTT
0.5% Nonidet®P-40
0.5% Tween® 20
50% Glycerol
10×Buffer組成:
〈另附Mg2+〉[Code No. TAP-2B]
100mM Tris-HCl(pH8.3)
500mM KCl
〈含有Mg2+〉[Code No. TAP-2M]
100mM Tris-HCl(pH8.3)
500mM KCl
15mM MgCl2
活性的定義:
在75℃活性測定條件下,在30分鐘內攝入10nmoles的全核苷酸使成為酸不溶物時所需酶的活性定義為1U。
來源:
E.coli重組體